一、什么是标记基因标记基因的分类
标记基因是生物学中,基因工程运用方面的专用词汇.
当人们想利用某些细菌产生某些物质时,会先提取目的基因,然后让目的基因与运载体结合,再将目的基因导入受体细胞,最后培养细胞进行表达.
标记基因就是在导入受体细胞时导入进取的人类的已知作用的基因,目的是为检测目的基因是否成功导入.由于一般都是有鸟枪法导入的目的基因,所以成功率并不是很高,目的基因的检测和筛选就显得很有必要.
例如:大肠杆菌的某种质粒具有青霉素抗性基因,当这种质粒与外源dna组合在一起形成重组质粒,并被转入受体细胞后,就可以根据受体是否吸饱具有青霉素抗性来判断受体细胞是否获得了目的基因.当人们用选择培养基(比如含有青霉素的培养基),来培养受体细胞时,能够在培养基中存活下来的受体细胞就可以认为是成功的导入了外源dna,标记基因就起作用了.
二、基因工程中标记基因的作用
标记基因，原本是基因工程的专属名词，但是现在它已经成为一种基本的实验工具，那么标记基因的作用有哪些呢？和报告基因的差别又是什么？据基因学资料显示，标记基因是一种已知功能或已知序列的基因，能够起着特异性标记的作用。在基因工程意义上来说，它是重组DNA载体的重要标记，通常用来检验转化成功与否；在基因定位意义上来说，它是对目的基因进行标志的工具，通常用来检测目的基因在细胞中的定位。标记基因广泛应用于分子生物学、细胞生物学、发育生物学等方面的研究。
举例说明：
1、“作为重组DNA载体的重要标记”举例：大肠杆菌的某种质粒具有青霉素抗性基因（该基因可以认为是标记基因），当这种质粒与外源DNA组合在一起形成重组质粒，并被转入受体细胞后，就可以根据受体细胞是否具有青霉素抗性来判断受体细胞是否获得了目的基因。当人们用选择培养基（比如含有青霉素的培养基），来培养受体细胞时，能够在培养基中存活下来的受体细胞就可以认为是成功的导入了外源DNA，标记基因就起作用了。
2、“作为目的基因的细胞定位工具”举例：通过将可定位检测的标记基因（只要已知其序列，既可针对设计标记探针，从而对其进行细胞定位）与目的基因进行连锁，当成功转化目的基因，该基因同时又成功表达后，既可间接对其进行定位；或者已知目的基因（该基因本身就处于某细胞中）周边序列，通过针对这些序列设计可插入标记基因，继而对该标记基因进行检测，也可间接对目的基因定位。
引入“选择基因”和“报告基因”的概念：
选择基因和报告基因都可以看做是标记基因，都起着标记目的基因是否成功转化的作用，但是它们又有着各自的特点。
选择基因（又称选择标记基因），主要是一类编码可使抗生素或除草剂失活的蛋白酶基因，这种基因在执行其选择功能时，通常存在检测慢（蛋白酶作用需要时间）、依赖外界筛选压力（如抗生素、除草剂）等缺陷。而报告基因则是指其编码产物能够被快速测定、且不依赖于外界压力的一类基因。
理想的报告基因通常具备如下基本要求：
①、受体细胞中不存在相应内源等位基因的活性；
②、它的产物是唯一的，且不会损害受体细胞；
③、具有快速、廉价、灵敏、定量和可重复性的检测特性。目前常用的报告基因有氯霉素乙酰转移酶基因（cat）、荧光素酶基因（luc）、β-葡萄糖苷酸酶基因（gus）等。
三、什么叫单拷贝基因？？？
是指基因组中拷贝数目少，只有1个或几个的基因，大多数是属于生物体内组成型表达持家基因。单拷贝基因是分子系统学中的一种极有价值的分子标记，在构建生命树的主干及主干和末梢之间的分枝中将起极其重要的作用。
四、求详细的基因表达载体的组成，要详细啊~····
完整的表达载体必须包括：
1、复制子，在细菌中扩增时所必须。
2、启动子，目的基因在细菌或细胞中转录所必须，转录了才能翻译，是谓“表达”。
3、原核筛选标记，细菌增菌所必须。
4、真核筛选标记，如果是真核表达，就是必须的。
5、多克隆位点，即酶切位点，插入目的片段的区域。
6、其他所需构件，可视实验设计情况而选用现成载体或在载体上自行添加。
基因有两个特点：
一是能忠实地复制自己，以保持生物的基本特征；
二是在繁衍后代上，基因能够“突变”和变异，当受精卵或母体受到环境或遗传的影响，后代的基因组会发生有害缺陷或突变。绝大多数产生疾病，在特定的环境下有的会发生遗传。也称遗传病。在正常的条件下，生命会在遗传的基础上发生变异，这些变异是正常的变异。
以上内容参考 百度百科——基因表达载体、百度百科——基因
五、基因工程中标记基因
目的基因的检测和鉴定是在确定目的基因已经导入受体细胞后，而不知道基因是否可以稳定维持和表达其遗传特性而进行的操作。标记基因的作用是：“为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。（也就是说是，鉴别和筛选含有目的基因的细胞）”。所以基因工程的第四步“目的基因的检测和鉴定”没有用到标记基因。标记基因的作用不是目的基因的检测和鉴定，而是鉴别和筛选含有目的基因的细胞。
六、基因工程中标记基因的作用到底是什么？
不同标记基因有不同作用，例如eGFP、eRFP等报告基因可在质粒转染细胞后起到细胞定位的作用，而如果你要做蛋白表达，在表达质粒上加标记基因如原核的Amp、Tet等，真核的Neo、Puro等，可在细菌或细胞培养时想培养基中加入相对应的药物，筛选出成功整合目的基因的阳性结果。
希望已经说明白了。