多聚甲醛检测（多聚甲醛检测标准）-全百科

本篇目录：

1、用4%多聚甲醛固定的活体组织还能不能进行RT-PCR检测?2、TUNEL分析3、流式-多聚甲醛4、多聚甲醛水分的测定5、多聚甲醛检测方法?6、多聚甲醛固定后组织膨胀的原因

用酒精的的话，不是用来固定的，是脱水用的，脱水后是要放100%的乙醇中冻与-20度的。固定式用4%的多聚甲醛4度过夜。

脑组织较软，且细胞成分不易保留，脑组织是较易软化的组织之一，血供也较为丰富，所以最好是在取脑组织前用4％多聚甲醛灌注固。经前固定后，取脑操作时，可减少脑组织损伤。

意思就是用多聚甲醛固定过的样本，必须在4小时内检测，否则容易导致串联染料降解，若要长时间保存，还是需要洗涤后，转移到不含多聚甲醛的缓冲液中。

组织脱水：过度固定可能会导致组织脱水，这可能会影响组织的结构和功能。总之，泡久了可能会对大鼠脑组织产生一些不可逆的影响，影响后续的研究和观察。

固定：加入4%多聚甲醛(PBS配制)固定20分钟。如暂时不能立即做组化检测，使用含0.4%多聚甲醛的PBSPH4浸泡细胞（免疫组化检测完成前不要让细胞变干，否则细胞收缩形态不好）。

TUNEL）。由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂，因而没有3-OH形成，很少能够被染色。由此，TUNEL成为了检测DNA片段化（细胞凋亡）的最常用方法。

TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling)是检测细胞凋亡的经典方法。

TUNEL 还可结合细胞同期的分析，可同时了解凋亡细胞DNA 断裂和细胞周期分布之间的关系，近来已成为鉴别和定量凋亡细胞的最常用方法之一。

三tunel测凋亡的荧光压制滤板压制滤板的作用是完全阻挡激发光通过，提供相应波长范围的荧光。与激发滤板相对应，常用以下3种压制滤板：紫外光压制滤板：可通过可见光、阻挡紫外光通过。能与UG-1或UG-5组合。

采用缺口末端标记技术TUNEL法检测辛伐他汀诱导K562细胞早期凋亡的变化。采用RT PCR检测K562细胞中Ras分子和PI3K AKT信号通路的n ras， pi3k， akt1， nf κb1 mRNA的差异表达。

用流式细胞仪/荧光显微镜机观察一下不就可以了么？检测凋亡细胞的绿色荧光及PI/DAPI的红色/蓝色荧光)上机分析一下就能看到凋亡和没有凋亡的细胞了。

如果检测的是前述表格中不会受多聚甲醛影响的分子，可用 1％多聚甲醛预固定保存，但FSC、SSC和荧光强度影响较大，如需避免此类缺点，可考虑流式中文网研发的细胞保存液（）。

多聚甲醛不可以直接跑流式。多聚甲醛是一种固态聚合物，具有不规则的颗粒形态。其具有温度敏感性，一般需加热到100℃以上才能溶解于水中，然后再进行处理。

多聚甲醛溶液对呼吸道有强烈刺激性，引起鼻炎、咽喉炎、肺炎和肺水肿。对呼吸道有致敏作用。眼直接接触可致灼伤。对皮肤有刺激性，引起皮肤红肿。口服强烈刺激皮肤长期反复接触引起干燥、皲裂、脱屑。

多聚甲醛之所以能够起到很好的固定效果，和它的制作工艺、物理性质和化学性质是分不开的。

一般来说都是将细胞悬液离心并弃上清后加入固定液，我们加的是70%的冰乙醇，加的量根据你细胞的多少。你这个涉及的测蛋白，那么加多聚甲醛的量和时间可能要控制得严一些才能保证最低限度不破坏a-SMA的结构。

1、mLm---试样的质量，g0.03003---与00mL盐酸标准滴定溶液｛m(HCl)=0.1000l/L}相当的多聚甲醛解聚后单体的质量，g多聚甲醛甲醛含量的测定通常采用碘量法、酸碱滴定法。

2、多聚甲醛甲醛含量的测定通常采用碘量法、酸碱滴定法。

3、用多聚甲醛配制称取280g多聚甲醛，加约700mL水和35mL氨水（GB631-77），加热溶解后趁热过滤或静置两天后取上清液，按下述规定的试验方法测定甲醛含量，再配制成约250g·L-1的甲醛溶液。

4、一粒一粒的加），很快多聚甲醛就会融解澄清。测试溶液PH，用磷酸调节PH＝4。容量瓶定容至 100 ml。将该100ml 8％的多聚甲醛溶液与等体积的 0.2M 的PB溶液混合，普通滤纸过滤即可。

1、因此，在进行流式细胞仪操作之前，需要先将多聚甲醛进行适当的处理，如通过酶处理、切割粉碎等方法将其转化为可操作的形态。流式细胞仪是一种可以实现高通量实验的生物学实验仪器，广泛应用于细胞免疫学和细胞生物学等领域。

2、如果检测的是前述表格中容易被多聚甲醛影响的分子，请尽量不要预固定，如需长期保存样本，可以考虑冻存单个核细胞。

3、本方法适用于脲醛树脂、三聚氰胺甲醛树脂和尿素一三聚氰胺甲醛树脂的游离甲醛含量测定。试样中游离甲醛、半缩醛与过量的亚硫酸钠溶液在0℃反应，生成羟甲烷基磺酸盐。用碘溶液滴定过量的亚硫酸钠。

4、一般情况下甲醛液体在较冷时久贮易混浊，在低温时则形成三聚甲醛沉淀。蒸发时有一部分甲醛逸出，但多数变成三聚甲醛。本品为强还原剂，在微量碱性时还原性更强。在空气中能缓慢氧化成甲酸。

5、f. 转步骤5。 a. 收集细胞(不超过200万细胞)，PBS或HBSS洗涤一次。b. 用4%多聚甲醛固定细胞30-60分钟。为防止细胞聚集成团，宜在侧摆摇床或水平摇床上缓慢摇动的同时进行固定。c. 用PBS或HBSS洗涤一次。

多聚甲醛之所以能够起到很好的固定效果，和它的制作工艺、物理性质和化学性质是分不开的。

固定过度：多聚甲醛是一种有效的细胞固定剂，但过度固定可能会导致组织结构变形或收缩。这可能会影响对组织结构和功能的观察和研究结果。抗原失活：在多聚甲醛中泡久了可能会影响某些抗原的免疫反应性。

在这里应该想到做western blot时用5%脱脂乳粉封闭，原因之一是为了将NC膜或PVDF膜上的未能结合蛋白的孔隙封闭住，防止二抗结合到孔内造成背景色，原因之二就是封闭其他的可能会与一抗结和的杂蛋白。

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