1、首先可以观察外形来判断：雄龟：肚皮是凹的，个体较小，龟壳黑色，躯干部长而薄，尾长柄细；雌龟：肚皮是平的，个体较大，龟壳棕黄色，纵棱显著，躯干部短而厚，尾短柄粗。
2、其次我们可以根据气味来判断：乌龟的雄体有浓烈异味，雌龟有较淡的异味;
3、我们还可以根据排泄孔位置及形状来判断：公龟的位置接近尾端，孔形长形。 母龟的位置接近腹甲，孔形圆形。
4、除此之外，我们还可以根据繁殖期的表现情况来判断：抓住成龟，当它的四肢和头尾皆欲缩人壳内时，用手指使劲住它的头及四肢，不让它有时间呼吸，此时乌龟泄殖孔内即排出副膀胱水，然后生殖器慢慢地外突，若只向外突出纵列的皱纹内壁者为雌龟。
5、乌龟交配时是采用雄上雌下的姿势，为了避免交配时由雌龟壳上滑落，所以雄龟的腹甲略为凹陷，正好可以卡住雌龟突起的背壳；但是雌龟就不需要这种构造，因此腹甲是平的。只要把乌龟翻过身来，用手指触摸腹甲的幅度，就能很快辨出雌雄了。