一、在基因工程中,标记基因是怎么标记的?同位素标记法?
楼主你对标记基因本身理解就有错误啊,标记基因本身作用就是标记,而不是要在它的里面做标记。所谓标记基因,经常是用于检测转基因时基因是否正确插入目标物种中并且顺利表达了。在基因工程中,狭义上,标记基因是指能够表现出特殊表型的基因,这些基因能够使目的基因插入和表达可视化。比如GFP(绿色荧光蛋白)或者GUS报告基因,在操作中,可以将这些基因和目的基因进行融合表达,那么如果目的基因表达了,那么就能通过这些报告基因的表型来检测基因是否表达和表达量的多少。比如检测GFP的荧光强度,或者GUS染色的情况等等。因为很多基因的表型并不是明显的,这些基因往往能够让基因的表达可视化,甚至能够做到表达的蛋白在细胞中的定位。
另外对于DNA插入的位置,同位素示踪法是不能检测出来的,因为这个方法只能从物理层面来指示出同位素的位置,我们并不能用它定位DNA在哪条染色体的哪个位置,这个位置并不是一个很纯粹的物理性概念,而应该归类于一个生化上的概念。一般对于DNA的插入位点,都是利用染色体步移法来做的。再另外,如果用同位素法检测是否插入的话,有一个非常重大的问题,就是同位素的放射性对生物体本身的一个伤害。放射性致DNA变异导致生物体死亡或者畸变,这个我相信楼主应该是知道吧,你觉得这个用于活体细胞实验现实不?
二、什么是标记基因 标记基因的分类
什么是标记基因 标记基因的分类
目的基因和标记(抗药)基因处于同一个质粒上.一般所用的质粒这两个基因由不同的启动子驱动.抗药基因都是持续表达,所以只有含有质粒的细菌才能存活并被扩增.而目的基因则根据情况而定.如果只是用来扩增,而不需要在细菌中表达(比如启动子是哺乳动物的),那目的基因就不会表达,而要转染到动物或人的细胞内才会表达.而如果是要用细菌来表达目的基因,则会采用细菌的启动子,这是抗药基因和目的基因同时表达.
三、什么是标记基因?
标记基因是帮助对转基因生物工程体进行筛选和鉴定的一类外源基因,包括选择标记基因和报告基因。在选择压下,不含标记基因及其产物的非转化细胞和组织死亡,转化细胞由于有抗性而可以继续存活。
常用的选择标记基因有抗生素抗性基因和除草剂抗性基因,常用的报告基因有荧光素酶(emphasis:role=italiclucemphasis)、氯霉素乙酰转移酶(emphasis:role=italiccatemphasis)以及绿色荧光蛋白(emphasis:role=italicgfpemphasis)基因等。有时,标记基因本身就是目的基因,如除草剂抗性基因。另外,还包括转入的载体骨架,如启动子序列、T-DNA左右边界等。
四、标记基因,插入基因,目的基因都分别说的是什么?
比方说吧,对于一个质粒,你把它转化到大肠杆菌里面,如果把这个大肠杆菌放在加有抗生素的培养基里面就挂了,而如果你在质粒上连一个基因表达出来的东西可以让大肠杆菌不挂,这个就是标记基因,用来筛选出成功转入了这个质粒的大肠杆菌。而质粒一般是作为外源基因表达的载体,你要表达某个基因,它就叫目的基因,可以通过PCR的方法扩增出来连到质粒上,对于质粒来说,这个基因就是插入基因,标记基因也是一个插入基因。 明白否~