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脱分化用什么培养基? thiamine

脱分化用什么培养基? thiamine

网上有很多关于脱分化用什么培养基?的知识,也有很多人为大家解答关于thiamine的问题,今天小编为大家整理了关于这方面的知识,让我们一起来看下吧!

内容导航:

一、脱分化用什么培养基?

二、盐酸硫胺的相关国家标准

三、维生素b族片的作用及功能是什么?

一、脱分化用什么培养基?

分化的植物根、茎和叶细胞总是全能的。在一定条件下,它们可以在体外培养,给予一定的营养和激素,可以脱分化成愈伤组织。由愈伤组织制备细胞悬液,在一定条件下振荡培养后,逐渐形成双极胚状体。进一步分化培养后,可以给予不同的营养和激素,就可以诞生完整的植株。植物的脱分化和分化培养证明分化的植物细胞仍然具有形成完整植株所需的一整套基因。在一定条件下,活性基因可以被关闭,被关闭的基因可以重新启动,可以进行从胚胎到成熟植株发育过程中相关基因的测序。

二、实验目的

1.通过实验,掌握无菌操作方法,将胡萝卜贮藏根培养成愈伤组织。

2.采用无菌操作方法,将烟草组织或甘蓝茎直接培养成小植株。

三、实验材料

每组胡萝卜中有两个贮藏根,每组花椰菜或烟草茎中有两个。

四、实验仪器和药物

每组由3个铝饭盒、2套大培养皿、2个250毫升烧杯、200毫升漂白粉滤液、70%酒精、酒精棉、2个镊子、2把安全刀、1个小镊子和无菌水组成。

每组6瓶脱分化培养基,30ml/瓶。

每组4瓶分化培养基,30ml/瓶。

女士养殖皮革:每升含

氯化钙2H2O 0.44

硝酸钾1.9克

硝酸铵1.65

0.15克磷酸二氢钾

硫酸镁7H2O 0.37

硫酸锰22.3毫克

硒酸锌7H2O 11.5毫克

H2BO3 6.2毫克

碘化钾0.83毫克

硫酸铜5H2O 0.025

二钼酸钠2H2O 0.25

氯化钴6H2O 0.025

硫酸亚铁7H2O 27.8毫克

乙二胺四乙酸钠37.3毫克

烟酸0.5毫克

盐酸硫胺素(B1) 0.1毫克

吡哆醇(B6) 0.1毫克

甘氨酸3.0毫克

肌肉-肌酸100.0毫克

蔗糖20.0克

固体培养基:含0.8%琼脂的MS液体。

断头培养:在MS培养基中加入2,4-D2毫克/升。

钡0.2毫克/升

分化培养基:1。含KT(或BA) 2mg/L的MS培养基

2.含KT(或ba) 2mg/l IAA0.05/l的MS培养基

其中KT是激动素,BA是6-苄基嘌呤,IAA是吲哚乙酸。

(2)一种分化培养基就足够了)

:实验描述

脱分化培养基和分化培养基的主要区别在于激素的组成和含量,说明各种激素的出现和含量变化在植物组织分化中起着重要作用。很多植物从脱分化到分化都需要培养基中有严格的激素成分,有些植物还要液体培养才能再次分化。比如说。胡萝卜根组织是研究植物细胞全能性最常用的材料,至今仍是研究脱分化的良好材料。而胡萝卜组织形成愈伤组织后,如果要再分化,必须经过摇瓶培养,采用合适的培养基,脱分化和分化培养可以直接在固体培养基上进行,不需要液体摇瓶培养,是两种较好的实验材料。

六、实验步骤

(1)手术前用温水和肥皂彻底洗手,尽量不要带菌。

(2)将事先用自来水洗净的烟梗、花菜梗或胡萝卜贮藏根切成一定大小(一般茎长、宽约2厘米)。

(3)完成以上步骤后,用70%酒精棉擦拭双手,进一步消毒。

(4)将切好的根或茎放入装有70%酒精的大培养皿中,用已消毒的镊子浸泡30秒。

(5)切片从酒精中取出后,立即在装有15%漂白粉片水溶液的大培养皿中浸泡20秒。

(6)将上述组织切片分别放入盛有无菌水I和II的铝制饭盒中漂洗10分钟,最后放入无菌水III中漂洗20分钟以上。

(7)切片从无菌水中取出后,立即放入9 cm无菌培养皿中,盖好,放入无菌接种盒中。

(八)在灭菌箱内,进行无菌操作,剪除植物茎、根的外侧和叶子的边缘。

(9)将正常部分切成3mm3mm1.5mm的正方形,将叶片组织切成1.5mm1.5mm的正方形。

(10)用镊子和接种针,在无菌条件下,将小块组织放入装有脱分化培养基的三角瓶中,每瓶放入5-6块茎、根组织或3-4块叶组织。挂标签,注明日期和组号。

(十一)20-25黑暗培养3-4周后观察。

(12)在分化培养的基础上,用同样的无菌操作方法接种烟草或甘蓝的茎和愈伤组织,然后观察3-4周。

胡萝卜材料只能通过液体培养基中的振荡培养来区分(此实验省略)

七、实验结果

(1)观察并记录接种的去分化组织细胞是否无污染?

(2)愈伤组织是否呈现绿色?讨论一下它的来源和影响?

(3)烟草组织或花菜茎分化培养后长成完整植株是什么意思?在理论和实践上有什么价值?

二、盐酸硫胺的相关国家标准

中华人民共和国(PRC)国家标准GB 14751-2010食品添加剂维生素B 1(盐酸硫胺素)的测定GB 7295-87饲料添加剂维生素B1(盐酸硫胺素)GB/T 5009.197-2003保健食品中盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、烟酸、烟酰胺和咖啡因的测定(硫胺素)性状:盐酸硫胺素(维生素B1盐酸盐59-43-8)为白色针状结晶粉末,有类似米糠和无水干燥产品能快速吸收空气中的水分(4%)。熔点为246 ~ 250。对热(170)稳定,溶于水,微溶于乙醇。不溶于苯和乙醚。常温下,亚硫酸盐可将本品分解为嘧啶和噻唑。氰化铁,如铁氰化钾,可被氧化成带蓝色荧光的脱氢硫胺素,即硫色素,据此可测定硫胺素的含量。用途:营养补充。维生素B1参与体内糖的中间代谢。体内维生素B1缺乏,导致辅羧酶活性降低,葡萄糖代谢受阻,从而影响机体的整个代谢过程。其中丙酮的脱羧被阻断,所以不能进入三羧酸循环,没有继续氧化而在组织中积累。此时神经组织的能量供应不足,因此相应的神经肌肉症状,如多发性神经炎、肌肉萎缩和水肿,严重时还会影响心肌和脑组织的功能。维生素B1缺乏还会导致消化不良、食欲不振和便秘。制备方法:天然产物存在于米糠、胚芽、酵母、豆类中,可从米糠或酵母中水解提取。合成方法很多。它可以由4-氨基-2-甲基-5-乙酰氨基嘧啶经水解、加成缩合、环化水解、氧化、取代等步骤制得。

三、维生素b族片的作用及功能是什么?

维生素B片包括8大类,常见的有维生素B1、 B2、 B6、 B12等。每种维生素的作用都不一样。维生素b1具有维持正常糖代谢的作用,维生素b2主要用于治疗口角炎或滑囊炎。维生素b6可以减轻恶心。泛酸钙在化妆品中起到保护和改善皮肤粗糙的作用。维生素b7可以治疗脱发,调节抑郁。

b族维生素是一类水溶性小分子化合物,没有类似的结构,一般以辅酶的形式参与各种生理过程。目前已知的B族维生素有:维生素B1(硫酸铵)、维生素B2(核黄素)、维生素B3(烟酸)、泛酸钙(泛酸)、维生素B6(吡哆醇)、维生素B7(生物素)、维生素B9(叶酸)、维生素B12(钴胺素)。

维生素B1又称硫胺素或抗神经炎素,是最早发现的维生素,由真菌、微生物和植物合成,而动物和人类只能从食物中获取。维生素B1主要存在于种子的外壳和胚芽中,如米糠和麸皮,酵母中也非常丰富。硫胺素由嘧啶环和噻唑环组成,参与体内糖代谢。

维生素B2又称核黄素,是一种B族维生素,微溶于水,在中性或酸性溶液中加热时稳定。是体内黄酶类(黄酶类在生物氧化还原中起氢转移作用)的成分,缺乏时会影响机体的生物氧化,引起代谢紊乱。其病变多表现为口、眼、外生殖器的炎症,如口角炎、唇炎、舌炎、结膜炎、滑囊炎等,故本品可用于上述疾病的预防和治疗。维生素B2在体内的储存量非常有限,所以应该每天通过饮食来提供。维生素B2的两个性质是其流失的主要原因:(1)可被光破坏;(2)在碱性溶液中加热会被破坏。

烟酰胺(维生素B3)在体内和体外具有多种光保护作用。能增强DNA修复,降低紫外线对皮肤免疫反应的影响,调节炎症细胞产生的皮肤屏障功能,修复紫外线造成的细胞损伤。因此,烟酰胺是一种很好的化妆品成分,传统上用于美白皮肤、抗衰老和建立皮肤保护屏障。

泛酸钙又称泛酸,是一种水溶性维生素,化学式为ch 2 OHC(ch 2 OHC(CH3)2 chohconhch 2ch2 cooh。其外观为淡黄色,因广泛存在于动植物中而得名泛酸。由于所有的食物都含有泛酸钙,所以几乎不缺乏。泛酸钙在食品工业中可用作发色助剂。每公斤肉添加0.01 ~ 0.022克,可使肉色良好。它也用作面包、蛋糕和乳制品的食品强化剂。在饲料工业中用作维生素添加剂,添加到家禽、猪、幼小反刍动物和鱼类的饲料中。在化妆品中,起到保护和改善皮肤粗糙的作用。

B6(维生素B6,也称为吡哆醇,包括吡哆醇,吡哆醛和吡哆胺。它在体内以磷酸盐的形式存在。它是一种水溶性维生素,遇光或碱易被破坏,不耐高温。1936年,它被命名为维生素B6。维生素B6为无色晶体,易溶于水和乙醇,在酸性溶液中稳定,在碱性溶液中易被破坏。吡哆醇耐热,而吡哆醛和吡哆胺不耐热。酵母、肝脏、谷物、肉、鱼、蛋、豆类和花生中富含维生素B6。维生素B6是人体内某些辅酶的成分,参与许多代谢反应,尤其与氨基酸代谢密切相关。维生素B6制剂防治妊娠呕吐和放射病呕吐的临床应用。

生物素,又称维生素H和辅酶R,是一种水溶性维生素,属于维生素B族,B7。它对于维生素C的合成以及脂肪和蛋白质的正常代谢至关重要。它是维持人体自然生长发育和正常人体功能与健康所必需的营养素。在肝脏、肾脏、酵母和乳汁中含量丰富,是生物体固定二氧化碳的重要因素。容易与蛋清中的蛋白质结合,大量的粗蛋白会阻碍生物素的吸收,导致生物素缺乏,如脱毛、体重减轻、皮炎等。生物素在生化反应途径如脂肪合成和糖原生成中起重要作用。生物素是秃顶者的救星,不仅可以防止头顶的脱发和光亮,还可以防止现代人常见的少年白发。它在保持皮肤健康方面也起着重要的作用。至于稳定神经系统的功效,目前尚未得到证实,但对抑郁症和失眠确实有帮助。

叶酸(维生素B9)在细胞代谢中起重要作用,如DNA和RNA的单碳代谢中的辅因子,在体内核苷酸和氨基酸的生物合成中起重要作用。叶酸是一种能与叶酸受体结合的小分子,在宫颈癌HeLa细胞和其他恶性肿瘤细胞中有较高的表达水平,因此叶酸可以靶向这些肿瘤细胞。叶酸在型糖尿病发病中的作用与维生素B1缺乏及其引起的高同型半胱氨酸血症有关。虽然缺乏并不常见,但在糖尿病患者中补充叶酸将有利于糖尿病的治疗。补充叶酸可以逆转微核的DNA损伤,从而减轻氧化应激对糖尿病患者的影响。

钴胺素(维生素B12)是生物学中分子量最大、最复杂的辅因子(15个官能团)。钴胺素因能促进脱卤而引起广泛关注,有证据表明几种厌氧菌引起的12种脱卤反应的细胞成分很可能是过渡金属辅酶。在怀孕和哺乳期间,对钴胺素的需求会增加,以满足母亲、胎儿和婴儿的需要。

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